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【bio-news】我们吃的不是“食物”，是“信息”

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铁杆站友

73楼

呵呵，什么季节吃什么菜呀，不然会干扰信息的

2011-09-22 20:40

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• 临床要不要去做超声，超声科待遇怎么样？

丁香园准中级站友

74楼

dickzyz
“食物中miRNA含量与在血液及这些器官中出现的含量相关，表明这些miRNA是通过食物摄入的”。
这个推论没有信服力，感觉不像是一般科研手段。要证明进入血液的miRNA来源于食物，一般会用放射性标记或者荧光label之类的来证实。这样没有逻辑的推论居然会出现在Cell Research上，有点吃惊。麻烦把文献名提供以下，让大家查实。

文中应用了测序和PCR的方法来证明血清和组织中的miRNA是植物来源的。用高碘酸氧化方法证明，血中的miRNA不可被氧化的部分是外来植物来源的。

2011-09-22 21:51

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• 我可能是试工里最主动最傻的那一个

丁香园准中级站友

75楼

dickzyz
没仔细看，抱歉，应该是肝细胞中的mir level。
但我的疑问，肝细胞中miR168a水平在注射aso后，基本和chow diet 6h持平了吧，这个变化和rice+anti-ncRNA相比，变化在90%左右了。你说的变化在50%左右，是在拿什么做比较？
另外，这个文章做了293T的免疫荧光，弄了那么多老鼠肝组织做qRT-PCR，却没有做miRNA的HRP label。这个就决定了这篇文献只能上Cell Research，而不是Nature。
rna在碱性环境下极易水解，产物是磷酸、嘌呤、嘧啶，是常识吧。没有直接证据，来证明miR-168a来源是口服的，是这篇文章的致命伤。

miRNA如何做HRP的标记？不是很明白。要标记用32P似乎更合适啊。
文中说miRNA是通过胃肠道的吸收然后被MVs包装释放入血的。模拟胃肠道的环境用的是PH2.0的酸性环境，且miRNA168a在煮过的大米中也稳定。也就是说高温和酸性环境都无法使得miRNA168a降解,碱性环境的降解没什么关系。

2011-09-22 22:02

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• #医生的昵称有多好笑#这是你们热爱工作的表现吗？哈哈哈哈

铁杆站友

76楼

dickzyz
没仔细看，抱歉，应该是肝细胞中的mir level。
但我的疑问，肝细胞中miR168a水平在注射aso后，基本和chow diet 6h持平了吧，这个变化和rice+anti-ncRNA相比，变化在90%左右了。你说的变化在50%左右，是在拿什么做比较？
另外，这个文章做了293T的免疫荧光，弄了那么多老鼠肝组织做qRT-PCR，却没有做miRNA的HRP label。这个就决定了这篇文献只能上Cell Research，而不是Nature。
rna在碱性环境下极易水解，产物是磷酸、嘌呤、嘧啶，是常识吧。没有直接证据，来证明miR-168a来源是口服的，是这篇文章的致命伤。

你看图5了吗？chow diet与rice中miR168a水平相差6倍，是完全不同的两种饲料。注射ASO都是在喂食rice的条件下比较的，rice与rice+ASO比较。

你说293T的实验是指那个荧光酶（luciferase）活性的实验吗？我在本文中看到用这种细胞构建LDLRAP1表达系统以检测miRNA对其影响的实验，不知你说的免疫荧光是哪个图？另，miRNA的HRP label？这是什么实验？请说明一下。

证明miRNAs来自口服分五部分，第一步（图一）半定量RT-PCR、NB证明动物和人血清中存在植物来源的miRNAs，再用两种方法证明实验动物各种组织中存在植物来源的miRNAs（Solexa sequencing，qRT-PCR）；第二步证明喂食后血清、肝中这些miRNAs升高与喂食时间有关（图二）；第三步用氧化法证明升高的miRNAs来源于植物，因为动物来源的RNAs对氧化敏感（图一）；第四步证明未检测到植物来源的miRNAs相应的前体RNAs（图S2B），而向肝肿瘤细胞HepG2中转入前体则可以处理为成熟的miRNAs（图3B）；第五步证明成熟的miRNA很稳定，而前体不稳定（图S2）。我个人认为证明已经相当充分了，你认为再用什么来证明比较好？

2011-09-23 00:17

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